如何消除环境中的支原体？

       细胞培养与支原体污染   

       支原体对细胞培养会带来严重的危害，同时，它的发生率较高，肉眼不易察觉。有报道，在细胞培养室中，它的平均发生率甚至可高达63%。在生物制品中，它的发生率为1%~3%。               细胞培养中支原体的来源       

细胞培养过程中，污染细胞的支原体主要有5个方面的可能来源：

       1、环境

       2、被污染的细胞

       3人体表面的携带（如口腔、鼻腔、皮肤等）

       4、实验试剂，如培养基、胰酶等

       5、未彻底消毒的实验器具

       其中，环境是造成支原体污染的一个主要原因。特别是多人培养细胞时共用同一培养箱、同一操作台，即使其中一个人很注意，但如果其他实验者给环境中带进支原体，以及培养箱箱门打开频繁，也会显著增加细胞中出现支原体污染的风险。因此环境预防远比在培养液中加入抗支原体药物重要。       

       处理细胞培养工作区域的支原体       

       这里的工作区域包括实验台、超净台、培养箱（水槽除外）、液氮罐、移液器、门把手等细胞培养的环境。使用德国MB公司生产的支原体祛除喷雾或湿巾（品名：Mycoplasma-off™），可在5-10分钟清除支原体，高效快速，操作方便。       

       产品特点及原理：   

       1）快速有效    喷雾剂和湿巾中含有支原体专用杀除剂Mynox®，可在几分钟内迅速杀除支原体。与传统的化学试剂熏蒸方法相比，更加安全；与传统酒精处理、紫外线照射方法相比更有效！   

       2）广谱抗菌    不仅能根除支原体，而且能有效祛除葡萄球菌、肠球菌、大肠杆菌、奇异变形杆菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、牛腹泻病毒、腺病毒、多瘤病毒、诺如病毒、牛痘病毒、真菌孢子等。   

       3）无腐蚀性和致癌性    乙醇作为溶剂，无腐蚀性和致癌性成分。   

       4）操作简便    即用型消毒液，可以快速简单地保持工作区的清洁干净。         

       使用方法及步骤：       

       喷雾剂:   

       注：对于细胞培养箱，内部喷洒支原体祛除喷雾或用湿巾擦拭后，应打开箱门通风至少1小时。如培养箱带热灭活功能，可开启该功能以替代风干。           

       湿巾:

       对于移液器，门把手，电子设备等，可使用支原体祛除湿巾。擦拭后，应让其被消毒物体的表面保持湿润，再让其自然风干。       

       培养箱水槽和水浴锅中预防支原体污染的方法       

       细胞培养环境中，培养箱水槽、水浴锅经常会有支原体以及各种细菌、霉菌滋生，稍有不慎或清洗不及时，水槽中的水源即会成为细胞污染的重要来源。保持水槽的洁净，对细胞培养的顺利进行非常重要。       

       推荐全球众多实验室日常都在使用德国MB公司生产的Water Shield支原体污染防护剂（水槽用）。Water Shield可持续作用四周，使水源避免受到支原体、细菌、酵母、霉菌和孢子的污染。             

       产品特点：   

       1）长效。Water Shield含表面活性剂、季铵盐和络合剂，不易挥发，可持续作用4周。             2）安全。不含醛类或叠氮化物，对细胞无毒害。   

       3）广谱。预防支原体、细菌、酵母菌、霉菌和孢子污染。   

       4）方便。Water Shield按1:200比例，直接加入水中，使用方便。   

       5）不产生水垢。         

       操作步骤：   

       1）Water Shield和蒸馏水可直接加入培养箱水槽或水浴锅中。   

       2）Water Shield按1:200比例使用，例如：1000ml蒸馏水+5ml Water Shield，或10L蒸馏水+50ml Water Shield。   

       3）4周左右清洗水槽，换水，重新加入Water Shield。           

       注意事项：避免吸入。眼睛接触或长时间皮肤接触可能会产生刺激性。因而，使用试剂时应戴上护目镜和一次性手套。一旦皮肤接触，应用大量水冲洗。Water Shield对玻璃、陶瓷、塑料、橡胶、钢制品、贵金属和其他金属安全性良好。